簡單介紹熒光濾光片的類型以及選取原則

　　熒光濾光片指的是應(yīng)用于熒光系統(tǒng)的濾光片，包括提取熒光能量或獲得熒光成像。它的主要特點(diǎn)是對(duì)干擾光的隔離度好，自發(fā)熒光干擾少。像PCR儀，熒光免疫分析儀，熒光顯微鏡等各種醫(yī)療分析和檢測儀器中都會(huì)用到熒光濾光片。它是應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)儀器的關(guān)鍵元件，主要作用是在熒光顯微光學(xué)系統(tǒng)中篩選激發(fā)光與發(fā)射光的特征波段光譜。
 

　　熒光濾光片按照帶通可以分為兩類：
 

　　(1)單通熒光片
 

　　比如典型的單通熒光濾鏡組，激發(fā)濾色片和發(fā)射濾色片都只有一個(gè)帶通(長通或短通)，通常只激發(fā)和篩選及相近染料的熒光，在實(shí)際應(yīng)用中，單通濾片是常用到的。
 

　　(2)多通熒光片
 

　　是指激發(fā)濾色片和發(fā)射濾色片都具有多個(gè)帶通(長通或短通)，可以同時(shí)激發(fā)DAPI、FITC和Texas Red。
 

　　在實(shí)際應(yīng)用中，多通濾片比較適合直接用眼睛觀察，如果用于成像很大機(jī)率會(huì)出現(xiàn)串色現(xiàn)象。
 

　　如果您有多個(gè)熒光濾光片組，就可以拍出多色熒光圖片了，隨之而來的重要問題就是——該如何選擇制樣時(shí)的多種染料？如何了解染料或者蛋白的激光和發(fā)射光波長？其實(shí)很簡單，在大家購買染料時(shí)說明書中會(huì)寫明相關(guān)的激發(fā)光和發(fā)射光波長。
 

　　熒光濾光片組的選取原則是：在成像端盡可能讓熒光(發(fā)射光)透過，同時(shí)防止其他熒光串色，以獲得更好的信噪比。在實(shí)際應(yīng)用中，大家可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提前和技術(shù)人員充分溝通后，獲得更佳的匹配方案。需要注意的是：濾色鏡組一般放在熒光轉(zhuǎn)盤內(nèi)，因此也一般不會(huì)出問題，切記不要拆下來自己擦拭，更不要粘上指紋，這樣會(huì)影響熒光透過率。